Jei jūsų gydytojas rekomendavo atlikti kariotipo tyrimą jums ar jūsų vaikui arba po amniocentezės, ką šis tyrimas reiškia? Kokias sąlygas gali diagnozuoti kariotipas, kokie veiksmai atliekami atliekant testus ir kokie jo apribojimai?
PASIEKA / SPL / „Getty Images“Kas yra kariotipo testas?
Kariotipas yra ląstelės chromosomų nuotrauka. Kariotipai gali būti paimti iš kraujo ląstelių, vaisiaus odos ląstelių (iš vaisiaus vandenų ar placentos) arba kaulų čiulpų ląstelių.
Sąlygos, kurioms diagnozuotas kariotipo testas
Kariotipai gali būti naudojami norint patikrinti ir patvirtinti chromosomų anomalijas, tokias kaip Dauno sindromas ir Katės akies sindromas, ir yra keli skirtingi anomalijų tipai.
Chromosomų anomalijos:
- Trisomijos, kuriose yra trys vienos chromosomos kopijos, o ne dvi
- Monosomijos, kuriose yra tik viena kopija (vietoj dviejų)
- Chromosomų ištrynimai, kai trūksta chromosomos dalies
- Chromosomų translokacijos, kai vienos chromosomos dalis yra prijungta prie kitos chromosomos (ir atvirkščiai, kai atliekama pusiausvyra).
Trisomijų pavyzdžiai:
- Dauno sindromas (21 trisomija)
- Edvardo sindromas (18 trisomija)
- Patau sindromas (13 trisomija)
- Klinefelterio sindromas (XXY ir kiti variantai) - Klinefelterio sindromas pasireiškia 1 iš 500 naujagimių vyrų
- Trigubo X sindromas (XXX)
Monosomijos pavyzdys apima:
- Turnerio sindromas (X0) arba X monosomija - maždaug 10% pirmojo trimestro persileidimų yra dėl Turnerio sindromo, tačiau ši monosomija pasireiškia tik maždaug 1 iš 2 500 gyvų moterų.
Chromosomų pašalinimo pavyzdžiai:
- Cri-du-Chat sindromas (trūksta 5 chromosomos)
- Williamso sindromas (trūksta 7 chromosomos)
Translokacijos - yra daugybė translokacijų, įskaitant translokacijos Dauno sindromą, pavyzdžių. Robertsonijos kalbos perkėlimai yra gana dažni, jų būna maždaug 1 iš 1000 žmonių.
Mozaika yra būklė, kai vienose kūno ląstelėse yra chromosomų anomalijos, o kitose - ne. Pvz., Mozaikos Dauno sindromas arba mozaikinė trisomija 9. Pilna trisomija 9 nesuderinama su gyvenimu, tačiau mozaikinė trisomija 9 gali sukelti gyvą gimimą.
Kai tai bus padaryta
Yra daugybė situacijų, kai jūsų gydytojas gali rekomenduoti kariotipą. Tai gali apimti:
- Kūdikiai ar vaikai, turintys sveikatos sutrikimų, rodančių chromosomų anomalijas, kurios dar nėra diagnozuotos.
- Suaugusieji, turintys simptomų, rodančių chromosomų anomaliją (pavyzdžiui, vyrai, sergantys Klinefelterio liga, gali būti nediagnozuojami iki brendimo ar pilnametystės.) Kai kurie mozaikos trisomijos sutrikimai taip pat gali būti nediagnozuoti.
- Nevaisingumas: dėl nevaisingumo gali būti atliekamas genetinis kariotipas. Kaip minėta aukščiau, kai kurie chromosomų anomalijos gali būti nediagnozuojamos iki pilnametystės. Moteris, turinti Turnerio sindromą, arba vyras, turintis vieną iš Klinefelterio variantų, gali nežinoti apie šią būklę, kol nesusitvarkys su nevaisingumu.
- Prenatalinis testavimas: Kai kuriais atvejais, pavyzdžiui, translokacijos Dauno sindromu, būklė gali būti paveldima, o tėvai gali būti tikrinami, jei vaikas gimė su Dauno sindromu. (Svarbu pažymėti, kad Dauno sindromas dažniausiai nėra paveldimas sutrikimas, o labiau tikėtina mutacija.)
- Negyvas gimimas: Kariotipas dažnai atliekamas atliekant bandymą po negyvo gimimo.
- Pasikartojantys persileidimai: Tėvų kariotipas dėl pasikartojančių persileidimų gali padėti suprasti šių pražūtingų pasikartojančių nuostolių priežastis. Manoma, kad chromosomų anomalijos, tokios kaip 16-oji trisomija, yra mažiausiai 50% persileidimų priežastis.
- Leukemija. Kariotipo tyrimas taip pat gali būti atliekamas siekiant padėti diagnozuoti leukemijas, pavyzdžiui, ieškant Filadelfijos chromosomos, randamos kai kuriems žmonėms, sergantiems lėtine mieloleukemija ar ūmine limfocitine leukemija.
Dalyvauja žingsniai
Kariotipo testas gali skambėti kaip paprastas kraujo tyrimas, dėl kurio daugelis žmonių susimąsto, kodėl taip ilgai užtrunka gauti rezultatai. Šis bandymas iš tikrųjų yra gana sudėtingas po surinkimo. Pažvelkime į šiuos veiksmus, kad galėtumėte suprasti, kas vyksta per tą laiką, kurio laukiate testo.
1. Mėginių rinkimas
Pirmasis kariotipo atlikimo žingsnis yra mėginio surinkimas. Naujagimiams renkamas kraujo mėginys, kuriame yra raudonųjų kraujo kūnelių, baltųjų kraujo kūnelių, serumo ir kitų skysčių. Kariotipas bus atliekamas baltųjų kraujo kūnelių, kurie aktyviai dalijasi (būklė, žinoma kaip mitozė). Nėštumo metu mėginys gali būti vaisiaus vandenys, surinkti atliekant amniocentezę, arba placentos gabalas, surinktas atliekant choriono gaurelių mėginių ėmimo testą (CVS). Vaisiaus vandenyje yra vaisiaus odos ląstelių, kurios naudojamos kariotipui generuoti.
2. Transportas į laboratoriją
Kariotipai atliekami specialioje laboratorijoje, vadinamoje citogenetikos laboratorija - laboratorijoje, kuri tiria chromosomas. Ne visose ligoninėse yra citogenetikos laboratorijos. Jei jūsų ligoninė ar medicinos įstaiga neturi savo citogenetikos laboratorijos, tiriamasis mėginys bus išsiųstas į laboratoriją, kuri specializuojasi kariotipo analizėje. Tiriamą mėginį analizuoja specialiai apmokyti citogenetikos technologai, Ph. citogenetikai ar medicinos genetikai.
3. Ląstelių atskyrimas
Norint išanalizuoti chromosomas, mėginyje turi būti ląstelės, kurios aktyviai dalijasi. Kraujyje baltieji kraujo kūneliai aktyviai dalijasi. Dauguma vaisiaus ląstelių taip pat aktyviai dalijasi. Mėginiui pasiekus citogenetikos laboratoriją, nesidalijančios ląstelės atskiriamos nuo dalijančių ląstelių naudojant specialias chemines medžiagas.
4. Ląstelių auginimas
Kad būtų pakankamai ląstelių analizei, dalijančios ląstelės auginamos specialiose terpėse arba ląstelių kultūroje. Šioje terpėje yra cheminių medžiagų ir hormonų, kurie leidžia ląstelėms dalytis ir daugintis. Šis kultivavimo procesas kraujo ląstelėms gali trukti nuo trijų iki keturių dienų, o vaisiaus ląstelėms - iki savaitės.
5. Ląstelių sinchronizavimas
Chromosomos yra ilga žmogaus DNR grandinė. Norint pamatyti chromosomas mikroskopu, chromosomos turi būti pačios kompaktiškiausios formos ląstelių dalijimosi (mitozės) fazėje, vadinamoje metafaze. Kad visos ląstelės patektų į šį specifinį ląstelių dalijimosi etapą, ląstelės yra apdorojamos chemine medžiaga, kuri sustabdo ląstelių dalijimąsi vietoje, kur chromosomos yra pačios kompaktiškiausios.
6. Chromosomų išlaisvinimas iš jų ląstelių
Kad mikroskopu būtų galima pamatyti šias kompaktiškas chromosomas, chromosomos turi būti iš baltųjų kraujo kūnelių. Tai daroma gydant baltuosius kraujo kūnelius specialiu tirpalu, kuris sukelia jų sprogimą. Tai daroma, kol ląstelės yra ant mikroskopinės skaidrės. Baltųjų kraujo kūnelių likučiai nuplaunami, o chromosomos lieka prilipusios prie stiklelio.
7. Chromosomų dažymas
Natūraliai chromosomos yra bespalvės. Norint atskirti vieną chromosomą iš kitos, ant stiklelio uždedami specialūs dažai, vadinami „Giemsa“ dažais. „Giemsa“ dažai nudažo chromosomų sritis, kuriose gausu adenino (A) ir timino (T) bazių. Nudažytos chromosomos atrodo kaip stygos su šviesiomis ir tamsiomis juostomis. Kiekviena chromosoma turi tam tikrą šviesos ir tamsių juostų modelį, kuris citogenetikui leidžia atskirti vieną chromosomą iš kitos. Kiekviena tamsi arba šviesi juosta apima šimtus skirtingų genų.
8. Analizė
Kai chromosomos nudažomos, plokštelė analizei atlikti dedama po mikroskopu. Tada nufotografuojamos chromosomos. Analizės pabaigoje bus nustatytas bendras chromosomų skaičius ir chromosomos išdėstytos pagal dydį.
9. Chromosomų skaičiavimas
Pirmasis analizės žingsnis yra chromosomų skaičiavimas. Dauguma žmonių turi 46 chromosomas. Žmonės, turintys Dauno sindromą, turi 47 chromosomas. Taip pat žmonėms gali trūkti chromosomų, daugiau nei vienos papildomos chromosomos arba trūkti arba dubliuoti chromosomos dalį. Žiūrint tik į chromosomų skaičių, galima diagnozuoti įvairias sąlygas, įskaitant Dauno sindromą.
10. Chromosomų rūšiavimas
Nustatęs chromosomų skaičių, citogenetikas pradės rūšiuoti chromosomas. Norėdami surikiuoti chromosomas, citogenetikas palygins chromosomų ilgį, centromerų išsidėstymą (sritis, kur sujungtos abi chromatidės), G juostų vietą ir dydžius. Chromosomų poros yra sunumeruotos nuo didžiausių (skaičius 1) iki mažiausių (skaičius 22). Tiksliai sutampa 22 chromosomų poros, vadinamos autosomomis. Taip pat yra lytinių chromosomų, moterys turi dvi X, o vyrai - X ir Y.
11. Pažvelgus į struktūrą
Be bendro chromosomų skaičiaus ir lytinių chromosomų, citogenetikas taip pat atsižvelgs į specifinių chromosomų struktūrą, kad įsitikintų, jog nėra trūkstamos ar papildomos medžiagos, taip pat struktūrinių anomalijų, tokių kaip translokacijos. Translokacija įvyksta, kai vienos chromosomos dalis yra prijungta prie kitos chromosomos. Kai kuriais atvejais dvi chromosomų dalys yra keičiamos (subalansuota translokacija), o kartais papildomas gabalas pridedamas arba jo trūksta vien iš vienos chromosomos.
12. Galutinis rezultatas
Galiausiai galutinis kariotipas parodo bendrą chromosomų skaičių, lytį ir bet kokias struktūrines anomalijas atskirose chromosomose. Sukuriamas skaitmeninis chromosomų vaizdas, kuriame visos chromosomos yra išdėstytos pagal skaičių.
Kariotipo testavimo ribos
Svarbu pažymėti, kad nors kariotipo tyrimas gali suteikti daug informacijos apie chromosomas, šis testas negali pasakyti, ar yra specifinių genų mutacijų, pavyzdžiui, sukeliančių cistinę fibrozę. Jūsų genetinis patarėjas gali padėti suprasti, ką gali pasakyti kariotipo tyrimai, ir ko ne. Norint įvertinti galimą genų mutacijų vaidmenį sergant ligomis ar persileidimais, reikia tolesnių tyrimų.
Taip pat svarbu pažymėti, kad kartais atliekant kariotipo tyrimus gali nepavykti nustatyti kai kurių chromosomų anomalijų, pavyzdžiui, kai yra placentos mozaikos.
Šiuo metu kariotipo bandymai prenatalinėje aplinkoje yra gana invaziniai, reikalaujant amniocentezės arba choriono gaurelių mėginių. Tačiau dabar ląstelių neturinčios DNR vertinimas motinos kraujo mėginyje yra daug mažiau invazinė alternatyva prenatalinei vaisiaus genetinių anomalijų diagnostikai.
Žodis iš „Wellwell“
Laukdami savo kariotipo rezultatų galite jaustis labai sunerimę, o savaitė ar dvi, kurios prireikia rezultatams pasiekti, gali jaustis kaip eonai. Skirkite tą laiką atsiremti į draugus ir šeimą. Taip pat gali būti naudinga sužinoti apie kai kurias su nenormaliomis chromosomomis susijusias sąlygas. Nors daugelis ligų, kurioms diagnozuotas kariotipas, gali būti pražūtingos, yra daug žmonių, gyvenančių tokiomis sąlygomis, turinčių puikią gyvenimo kokybę.
